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植物(wù)基因組DNA提取 (磁珠法）

發布時間：

2024-03-22 08:47

植物(wù)基因組DNA提取

(磁珠法）

 

小(xiǎo)麥是我國(guó)主要糧食作(zuò)物(wù)之一，所以關于小(xiǎo)麥分(fēn)子生物(wù)學(xué)方面的研究也非常重要，技(jì )術也日益深入，不論是基因克隆與轉化，遺傳圖譜構建，特定基因型檢測，分(fēn)子标記輔助育種及DNA指紋數據庫構建等，在小(xiǎo)麥育種中(zhōng)應用(yòng)廣泛，高質(zhì)量的DNA提取的在分(fēn)子水平上對植物(wù)進行系統分(fēn)析與研究的基礎，而植物(wù)基因組DNA提取的方法有(yǒu)許多(duō)，但是多(duō)數需要以植物(wù)新(xīn)鮮組織為(wèi)樣本，這樣限制條件較多(duō)且步驟多(duō)，耗時長(cháng)。而植物(wù)種子可(kě)以在常溫下保存，這樣作(zuò)為(wèi)提取基因DNA時可(kě)以不受季節和形态等問題限制。下面我們以多(duō)種植物(wù)種子為(wèi)實驗材料采用(yòng)

上海領駿生物(wù)有(yǒu)限公(gōng)司的植物(wù)基因組DNA提取試劑盒（磁珠法）提取植物(wù)基因組DNA

這種試劑盒内包括裂解結合液、磁珠、異丙醇、PK、DTT、洗滌液，還有(yǒu)洗脫液等試劑。

  • 樣本處理(lǐ)

  花(huā)生 玉米 小(xiǎo)麥

  • 裂解結合

在使用(yòng)時，需要将種子樣本放置研缽中(zhōng)破碎，然後加入裂解結合液，使DNA/RNA從細胞中(zhōng)釋放出來，然後離心取上清。

  • 洗滌

使用(yòng)試劑盒中(zhōng)的洗滌液進行洗滌，這一步可(kě)提高基因組的純度。不同樣本可(kě)進行輕微調整。

  • 洗脫

洗脫的步驟是将吸附在磁珠表面的基因組DNA洗脫下來，并溶于洗脫液中(zhōng)，然後進行其他(tā)下遊實驗。

現将結果報道如下：

案例1：同一批次試劑提取不同植物(wù)種子的實驗結果：

樣本

序号

A260/A280

A260/A230

Conc.(ng/μL)

花(huā)生胚芽5 mg

1

1.903

1.063

391.85

2

1.935

1.162

388.85

3

1.950

1.195

395.45

平均值

1.929

1.140

392.05

玉米20 mg

4

2.192

1.897

518.35

5

2.180

1.896

542.1

6

2.188

1.906

538.9

平均值

2.187

1.9

533.117

小(xiǎo)麥10 mg

7

2.03

1.32

77.65

8

2.006

1.316

80.85

9

2.003

1.268

81.4

平均值

2.013

1.301

79.967

 

  

圖1 核酸提取電(diàn)泳圖

上海領駿生物(wù)科(kē)技(jì )有(yǒu)限公(gōng)司成立于2016年，位于上海市青浦區(qū)張江雲立方園區(qū)。公(gōng)司長(cháng)期緻力于生物(wù)領域内相關産(chǎn)品的研發、生産(chǎn)和銷售，産(chǎn)品主要包括磁性納米材料和磁珠法核酸提取純化試劑。公(gōng)司一直堅持以“質(zhì)量、誠信、團結、奮進”為(wèi)宗旨，嚴格規範質(zhì)量管理(lǐ)體(tǐ)系，持續創新(xīn)、精(jīng)益求精(jīng)，為(wèi)客戶提供優質(zhì)的産(chǎn)品和服務(wù)，被認定為(wèi)上海市專精(jīng)特新(xīn)企業。

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